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成分分析,配方還原,食品檢測(cè),藥品檢測(cè),化妝品檢測(cè),環(huán)境檢測(cè),性能檢測(cè),耐熱性檢測(cè),安全性能檢測(cè),水質(zhì)檢測(cè),氣體檢測(cè),工業(yè)問(wèn)題診斷,未知成分分析,塑料檢測(cè),橡膠檢測(cè),金屬元素檢測(cè),礦石檢測(cè),有毒有害檢測(cè),土壤檢測(cè),msds報(bào)告編寫(xiě)等。

大腸菌群培養(yǎng)法檢測(cè)

發(fā)布時(shí)間:2025-08-13

關(guān)鍵詞:大腸菌群培養(yǎng)法測(cè)試機(jī)構(gòu),大腸菌群培養(yǎng)法項(xiàng)目報(bào)價(jià),大腸菌群培養(yǎng)法測(cè)試標(biāo)準(zhǔn)

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來(lái)源:北京中科光析科學(xué)技術(shù)研究所

文章簡(jiǎn)介:

大腸菌群培養(yǎng)法是用于檢測(cè)食品、飲用水及環(huán)境樣品中大腸菌群的經(jīng)典微生物學(xué)方法,通過(guò)模擬腸道環(huán)境培養(yǎng),依據(jù)菌落形態(tài)、生化反應(yīng)等特征判定菌群存在,是評(píng)估樣品衛(wèi)生質(zhì)量的重要指標(biāo)。
點(diǎn)擊咨詢(xún)

因業(yè)務(wù)調(diào)整,部分個(gè)人測(cè)試暫不接受委托,望見(jiàn)諒。

檢測(cè)項(xiàng)目

大腸菌群計(jì)數(shù)(MPN法):采用多管發(fā)酵法,通過(guò)不同稀釋度樣品接種乳糖膽鹽發(fā)酵管,依據(jù)產(chǎn)氣情況推測(cè)菌群數(shù)量,檢測(cè)范圍3~1100MPN/100g(mL)。

大腸菌群平板計(jì)數(shù)法:使用月桂基硫酸鹽胰蛋白胨瓊脂(LST)或結(jié)晶紫中性紅膽鹽瓊脂(VRBA),通過(guò)平板涂布或傾注法培養(yǎng),計(jì)數(shù)典型菌落,計(jì)數(shù)范圍10~1000CFU/g(mL)。

大腸埃希氏菌鑒定:對(duì)疑似大腸菌群菌落進(jìn)行靛基質(zhì)試驗(yàn)、甲基紅試驗(yàn)、伏-普試驗(yàn)和檸檬酸鹽利用試驗(yàn)(IMViC試驗(yàn)),符合大腸埃希氏菌特征(++--)的菌落判定為目標(biāo)菌。

乳糖發(fā)酵試驗(yàn):接種樣品至乳糖膽鹽發(fā)酵管,36±1℃培養(yǎng)24±2小時(shí),觀(guān)察產(chǎn)氣情況,產(chǎn)氣者為初發(fā)酵陽(yáng)性。

復(fù)發(fā)酵試驗(yàn):將初發(fā)酵陽(yáng)性管接種至伊紅美藍(lán)瓊脂(EMB)平板,36±1℃培養(yǎng)24±2小時(shí),挑取典型菌落(紫黑色有金屬光澤)再接種至乳糖發(fā)酵管,產(chǎn)氣者為確認(rèn)陽(yáng)性。

菌落形態(tài)觀(guān)察:記錄菌落大小(直徑1~3mm)、顏色(紫黑色、粉紅色)、邊緣(整齊)、表面(光滑、濕潤(rùn))等特征,用于初步判定菌群類(lèi)型。

生化反應(yīng)驗(yàn)證:除IMViC試驗(yàn)外,補(bǔ)充葡萄糖發(fā)酵試驗(yàn)(產(chǎn)酸產(chǎn)氣)、過(guò)氧化氫酶試驗(yàn)(陽(yáng)性)、氧化酶試驗(yàn)(陰性)等,確認(rèn)大腸菌群的分類(lèi)地位。

產(chǎn)志賀毒素大腸埃希氏菌(STEC)篩查:采用聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)檢測(cè)stx1、stx2基因,或使用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)志賀毒素,檢測(cè)限10CFU/g。

耐熱大腸菌群檢測(cè):將樣品接種至EC肉湯,44.5±0.2℃培養(yǎng)24±2小時(shí),產(chǎn)氣者為陽(yáng)性,用于評(píng)估糞便污染的新鮮度。

大腸菌群最可能數(shù)(MPN)計(jì)算:根據(jù)多管發(fā)酵法的陽(yáng)性管數(shù),查MPN表得出每100g(mL)樣品中的大腸菌群數(shù)量,置信區(qū)間95%。

糞便大腸菌群檢測(cè):使用MFC瓊脂(m-FC瓊脂),44.5±0.2℃培養(yǎng)24±2小時(shí),計(jì)數(shù)藍(lán)色菌落,用于指示糞便污染來(lái)源。

大腸菌群藥敏試驗(yàn):采用 Kirby-Bauer 紙片擴(kuò)散法,檢測(cè)大腸菌群對(duì)頭孢菌素、喹諾酮類(lèi)等抗生素的敏感性,測(cè)量抑菌圈直徑(≥15mm為敏感)。

檢測(cè)范圍

食品樣品:包括肉類(lèi)、乳制品、水產(chǎn)品、蔬菜、水果、糧食制品、糕點(diǎn)、飲料、蜜餞、速凍食品等,評(píng)估食品衛(wèi)生質(zhì)量是否符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)。

飲用水:自來(lái)水、礦泉水、純凈水、桶裝水、瓶裝水、直飲水等,檢測(cè)是否符合《生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》(GB 5749-2022)中的大腸菌群指標(biāo)。

環(huán)境水樣:河水、湖水、井水、污水、景觀(guān)水、農(nóng)田灌溉水、養(yǎng)殖廢水等,監(jiān)測(cè)環(huán)境水體的污染狀況及自?xún)裟芰Α?/p>

食品接觸材料:食品包裝紙、塑料包裝膜、金屬罐、玻璃容器、餐具、廚具、食品加工設(shè)備表面等,檢測(cè)是否有大腸菌群從材料遷移至食品中。

化妝品:護(hù)膚品、化妝品、洗滌劑、牙膏、濕巾、面膜等,評(píng)估產(chǎn)品的微生物污染程度,防止皮膚感染。

飼料:畜禽飼料、水產(chǎn)飼料、寵物飼料、青貯飼料、復(fù)合飼料等,防止飼料中的大腸菌群污染動(dòng)物產(chǎn)品,影響動(dòng)物健康。

醫(yī)療用品:一次性注射器、輸液器、敷料、手術(shù)器械、消毒棉球、醫(yī)用手套等,檢測(cè)無(wú)菌醫(yī)療用品的微生物指標(biāo),確保醫(yī)療安全。

農(nóng)業(yè)環(huán)境:土壤、肥料、農(nóng)業(yè)廢棄物、溫室灌溉水、畜禽養(yǎng)殖場(chǎng)環(huán)境等,監(jiān)測(cè)農(nóng)業(yè)生產(chǎn)環(huán)境中的大腸菌群污染,預(yù)防農(nóng)產(chǎn)品污染。

餐飲具:餐廳餐具、食堂餐具、酒店餐具、家庭餐具、外賣(mài)餐盒等,檢測(cè)餐具的清潔消毒效果,符合《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 消毒餐(飲)具》(GB 14934-2016)要求。

寵物用品:寵物食品、寵物玩具、寵物窩墊、寵物美容工具、寵物飲用水等,評(píng)估寵物用品的衛(wèi)生狀況,防止寵物感染疾病。

環(huán)境表面:食品加工車(chē)間地面、墻面、設(shè)備表面、公共廁所扶手、電梯按鈕、商場(chǎng)購(gòu)物車(chē)等,檢測(cè)環(huán)境表面的大腸菌群污染,評(píng)估清潔效果。

嬰幼兒用品:嬰幼兒奶粉、嬰幼兒輔食、奶瓶、奶嘴、嬰兒紙尿褲、嬰兒濕巾等,確保嬰幼兒用品的微生物安全。

檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)

GB 4789.3-2016《食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 大腸菌群計(jì)數(shù)》:規(guī)定了食品中大腸菌群的MPN計(jì)數(shù)法和平板計(jì)數(shù)法。

ISO 4832:2006《食品和動(dòng)物飼料的微生物學(xué) 大腸菌群計(jì)數(shù) 37℃菌落計(jì)數(shù)法》:國(guó)際標(biāo)準(zhǔn),用于食品和動(dòng)物飼料中大腸菌群的平板計(jì)數(shù)。

GB/T 5750.12-2023《生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法 微生物指標(biāo)》:規(guī)定了生活飲用水中大腸菌群的檢測(cè)方法,包括膜過(guò)濾法和多管發(fā)酵法。

ISO 9308-1:2014《水質(zhì) 大腸菌群的檢測(cè)和計(jì)數(shù) 第1部分:膜過(guò)濾法》:國(guó)際標(biāo)準(zhǔn),用于水質(zhì)中大腸菌群的膜過(guò)濾檢測(cè)。

GB 14934-2016《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 消毒餐(飲)具》:規(guī)定了消毒餐(飲)具中大腸菌群的限量要求和檢測(cè)方法。

ASTM D6913-20《水和廢水大腸菌群的標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)方法(膜過(guò)濾法)》:美國(guó)材料與試驗(yàn)協(xié)會(huì)標(biāo)準(zhǔn),用于水和廢水的大腸菌群檢測(cè)。

ISO 7251:2005《食品和動(dòng)物飼料的微生物學(xué) 大腸埃希氏菌計(jì)數(shù) 平板計(jì)數(shù)法》:國(guó)際標(biāo)準(zhǔn),用于食品和動(dòng)物飼料中大腸埃希氏菌的計(jì)數(shù)。

GB/T 23740-2009《飼料中大腸菌群的測(cè)定》:規(guī)定了飼料中大腸菌群的MPN計(jì)數(shù)法。

GB/T 18204.4-2013《公共場(chǎng)所衛(wèi)生檢驗(yàn)方法 第4部分:公共用品用具微生物》:規(guī)定了公共場(chǎng)所公共用品用具中大腸菌群的檢測(cè)方法。

ISO 16649-1:2001《食品和動(dòng)物飼料的微生物學(xué) 產(chǎn)志賀毒素大腸埃希氏菌(STEC)檢測(cè) 第1部分:免疫磁分離和核酸擴(kuò)增法》:國(guó)際標(biāo)準(zhǔn),用于STEC的檢測(cè)。

GB 2762-2017《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中污染物限量》:規(guī)定了食品中大腸菌群的限量要求。

檢測(cè)儀器

微生物培養(yǎng)箱:提供恒溫環(huán)境,用于大腸菌群的培養(yǎng),溫度控制范圍25~45℃,精度±0.5℃,支持12/24小時(shí)定時(shí)功能,確保培養(yǎng)條件穩(wěn)定。

高壓蒸汽滅菌器:用于培養(yǎng)基、樣品容器及實(shí)驗(yàn)器材的滅菌,壓力103.4kPa,溫度121℃,滅菌時(shí)間15~30分鐘,徹底殺滅微生物,防止交叉污染。

生物安全柜:保護(hù)實(shí)驗(yàn)人員及樣品免受微生物污染,classⅡ型,風(fēng)速0.38~0.5m/s,過(guò)濾效率99.99%,用于樣品處理和菌落挑取等操作。

顯微鏡:用于觀(guān)察大腸菌群的形態(tài)特征,放大倍數(shù)100~1000倍,配備相差物鏡和目鏡測(cè)微尺,可清晰觀(guān)察菌落結(jié)構(gòu)和細(xì)胞形態(tài)。

菌落計(jì)數(shù)器:用于平板計(jì)數(shù)法中的菌落計(jì)數(shù),自動(dòng)識(shí)別菌落,計(jì)數(shù)范圍0~9999CFU,誤差±1%,提高計(jì)數(shù)效率和準(zhǔn)確性。

恒溫水浴鍋:用于復(fù)發(fā)酵試驗(yàn)、耐熱大腸菌群檢測(cè)中的溫度控制,溫度范圍30~100℃,精度±0.1℃,支持循環(huán)水浴,保持溫度均勻。

PCR儀:用于產(chǎn)志賀毒素大腸埃希氏菌(STEC)的基因檢測(cè),溫度范圍4~99℃,加熱速率5℃/s,支持多重PCR反應(yīng),快速擴(kuò)增目標(biāo)基因。

酶標(biāo)儀:用于酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)中的結(jié)果讀取,波長(zhǎng)范圍400~750nm,吸光度范圍0~4.0A,精度±0.005A,準(zhǔn)確測(cè)量樣品中的志賀毒素含量。

膜過(guò)濾裝置:用于水質(zhì)樣品的大腸菌群檢測(cè),過(guò)濾面積47mm,孔徑0.45μm,支持負(fù)壓或正壓過(guò)濾,截留水中的大腸菌群。

電子天平:用于樣品稀釋和培養(yǎng)基配制,量程0~200g,精度0.01g,具備防風(fēng)罩,確保稱(chēng)量準(zhǔn)確。

生化培養(yǎng)箱:用于大腸菌群的生化反應(yīng)試驗(yàn),溫度范圍10~50℃,濕度范圍40%~90%,模擬腸道環(huán)境,促進(jìn)菌群生長(zhǎng)。

超凈工作臺(tái):用于培養(yǎng)基配制和樣品接種的無(wú)菌操作,風(fēng)速0.3~0.5m/s,過(guò)濾效率99.97%,防止空氣中的微生物污染樣品。

離心機(jī):用于樣品的離心處理,轉(zhuǎn)速范圍0~10000rpm,容量1.5~50mL,分離樣品中的固體顆粒和微生物。

pH計(jì):用于培養(yǎng)基和樣品的pH值測(cè)量,測(cè)量范圍0~14,精度±0.01pH,確保培養(yǎng)基的pH值符合大腸菌群生長(zhǎng)要求(pH7.0~7.4)。

檢測(cè)流程

1、咨詢(xún):提品資料(說(shuō)明書(shū)、規(guī)格書(shū)等)

2、確認(rèn)檢測(cè)用途及項(xiàng)目要求

3、填寫(xiě)檢測(cè)申請(qǐng)表(含公司信息及產(chǎn)品必要信息)

4、按要求寄送樣品(部分可上門(mén)取樣/檢測(cè))

5、收到樣品,安排費(fèi)用后進(jìn)行樣品檢測(cè)

6、檢測(cè)出相關(guān)數(shù)據(jù),編寫(xiě)報(bào)告草件,確認(rèn)信息是否無(wú)誤

7、確認(rèn)完畢后出具報(bào)告正式件

8、寄送報(bào)告原件

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